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日程:间充质干细胞技术培训胚胎干细胞技术培训IPS细胞培养技术培训crispr-cas9技术培训



间充质干细胞技术培训日程(2017年7月17日-20日)



2017年7月17日 理论课程
9:00-9:10签到,致辞
9:10-10:00培训班开班仪式,相关情况介绍
10:00-11:30专家讲座:间充质干细胞研究进展报告
11:30-13:00午休
13:00-17:00间充质干细胞成脂分化
2017年7月18日 实操课程
9:00-10:00当天实验内容介绍与背景知识
10:00-11:30大鼠BMSCs和ADSCs的分离
11:30-13:00午休
13:00-17:00制备神经悬球,成软骨悬球
2017年7月19日 实操课程
9:00-10:00当天实验内容介绍与背景知识
10:00-10:20给昨天制备的细胞换液
10:20-11:30三系分化的操作:成脂鉴定,包括BMSCs和ADSCs,包括试剂配置,染色步骤,显色
11:30-13:00午休
13:00-17:00成骨分化鉴定,包括BMSCs和ADSCs,包括试剂配置,染色步骤,显色,比较成脂及成骨能力的差异。软骨细胞分化,包括细胞球制备,软骨细胞固定,包埋,切片、软骨细胞染色观察。
2017年7月20日 实操课程
9:00-10:00当天实验内容介绍与背景知识
10:00-11:30神经分化细胞RNA提取,成骨分化基因的鉴定
11:30-13:00午休
13:00-13:30Q-PCR鉴定特征分子的表达
13:30-14:00细胞固定并结合荧光标记的抗体(6皿细胞:2皿BMSC,4皿ADSC);
14:00-15:00流式技术确定骨髓及脂肪间充质干细胞表面特征分子的表达
15:00-16:00实验问题总结与交流
16:00-17:00颁发结业证书

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胚胎干细胞技术培训日程(2017年7月21日-24日)


9:00-10:00ES细胞研究进展介绍
10:00-11:00干细胞库及临床干细胞研究介绍
11:00-11:30人ES细胞实验流程介绍
11:30-13:00午休
13:00-15:00小鼠胚胎成纤维细胞原代取材
15:00-17:00复苏滋养层细胞
2017年7月22日 实操课程
9:00-11:30人ES细胞的复苏
11:30-13:00午休
13:00-17:00人ES细胞的机械传代
2017年7月23日 实操课程
9:00-10:00滋养层细胞MEF制备
10:00-11:30人ES细胞的胶原酶传代
11:30-13:00午休
13:00-15:00人ES细胞体外诱导分化
15:00-17:00复苏细胞换液观察
2017年7月24日 实操课程
9:00-9:20机械传代换液观察
9:20-10:30人ES细胞的冻存
10:30-11:30人ES细胞的无滋养层培养
11:30-13:00午休
13:00-14:00人ES体外分化细胞观察
14:00-16:00人ES细胞的鉴定:标志基因的免疫荧光染色及碱性磷酸酶染色
16:00-17:00颁发结业证书

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IPS细胞培养技术培训日程(2017年7月25日-28日)


2017年7月25日 理论课程
9:00-10:00iPS细胞研究进展介绍
10:00-11:00干细胞库及临床干细胞研究介绍
11:00-11:30iPS细胞制备流程介绍
11:30-13:00午休
13:00-15:00病毒包装相关质粒的转染
15:00-17:00小鼠iPS细胞的传代与类胚体的培养
2017年7月26日 实操课程
9:00-11:30MEF与HEF的传代与铺板
11:30-13:00午休
13:00-17:00小鼠胚胎成纤维原代细胞的制备
2017年7月27日 实操课程
9:00-9:30小鼠iPS细胞克隆形态观察
9:30-11:30标志性基因的免疫荧光染色实验与AKP染色实验
11:30-13:00午休
13:00-17:00病毒感染
2017年7月28日 实操课程
9:00-9:30病毒感染细胞培养液的更换
9:30-11:30AKP染色、免疫荧光染色结果观察
11:30-13:00午休
13:00-14:00类胚体形态观察;病毒滴度测定
14:00-15:00畸胎瘤形成实验:iPS细胞注射
15:00-16:00观察重编程起始阶段的细胞形态变化
16:00-17:00颁发结业证书

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crispr-cas9技术培训日程(2017年7月29日-8月1日)


2017年7月29日 理论课程
9:00-10:00培训班开班仪式,相关情况介绍
10:00-11:30专家讲座:基因编辑研究进展报告
11:30-13:00午休
13:00-15:00Crispr/Cas9 基因编辑技术策略
15:00-17:00碱基退火
2017年7月30日 实操课程
9:00-11:30当天实验内容介绍与背景知识
11:30-13:00午休
13:00-17:00Crispr/Cas9 gRNA 载体构建(载体酶切,连接,转化)
2017年7月31日 实操课程
9:00-10:00当天实验内容介绍与背景知识
10:00-11:30载体构建-挑克隆,小摇PCR鉴定
11:30-13:00午休
13:00-15:00基因编辑细胞的转染
15:00-17:00基因编辑细胞的鉴定
2017年8月1日 实操课程
9:00-11:30当天实验内容介绍与背景知识
11:30-13:00午休
13:00-15:30基因编辑细胞的筛选
15:30-16:00实验问题总结与交流
16:00-17:00颁发结业证书


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