日程:间充质干细胞技术培训、胚胎干细胞技术培训、IPS细胞培养技术培训、crispr-cas9技术培训
间充质干细胞技术培训日程(2017年7月17日-20日)
2017年7月17日 理论课程 | |
9:00-9:10 | 签到,致辞 |
9:10-10:00 | 培训班开班仪式,相关情况介绍 |
10:00-11:30 | 专家讲座:间充质干细胞研究进展报告 |
11:30-13:00 | 午休 |
13:00-17:00 | 间充质干细胞成脂分化 |
2017年7月18日 实操课程 | |
9:00-10:00 | 当天实验内容介绍与背景知识 |
10:00-11:30 | 大鼠BMSCs和ADSCs的分离 |
11:30-13:00 | 午休 |
13:00-17:00 | 制备神经悬球,成软骨悬球 |
2017年7月19日 实操课程 | |
9:00-10:00 | 当天实验内容介绍与背景知识 |
10:00-10:20 | 给昨天制备的细胞换液 |
10:20-11:30 | 三系分化的操作:成脂鉴定,包括BMSCs和ADSCs,包括试剂配置,染色步骤,显色 |
11:30-13:00 | 午休 |
13:00-17:00 | 成骨分化鉴定,包括BMSCs和ADSCs,包括试剂配置,染色步骤,显色,比较成脂及成骨能力的差异。软骨细胞分化,包括细胞球制备,软骨细胞固定,包埋,切片、软骨细胞染色观察。 |
2017年7月20日 实操课程 | |
9:00-10:00 | 当天实验内容介绍与背景知识 |
10:00-11:30 | 神经分化细胞RNA提取,成骨分化基因的鉴定 |
11:30-13:00 | 午休 |
13:00-13:30 | Q-PCR鉴定特征分子的表达 |
13:30-14:00 | 细胞固定并结合荧光标记的抗体(6皿细胞:2皿BMSC,4皿ADSC); |
14:00-15:00 | 流式技术确定骨髓及脂肪间充质干细胞表面特征分子的表达 |
15:00-16:00 | 实验问题总结与交流 |
16:00-17:00 | 颁发结业证书 |
胚胎干细胞技术培训日程(2017年7月21日-24日)
9:00-10:00 | ES细胞研究进展介绍 |
10:00-11:00 | 干细胞库及临床干细胞研究介绍 |
11:00-11:30 | 人ES细胞实验流程介绍 |
11:30-13:00 | 午休 |
13:00-15:00 | 小鼠胚胎成纤维细胞原代取材 |
15:00-17:00 | 复苏滋养层细胞 |
2017年7月22日 实操课程 | |
9:00-11:30 | 人ES细胞的复苏 |
11:30-13:00 | 午休 |
13:00-17:00 | 人ES细胞的机械传代 |
2017年7月23日 实操课程 | |
9:00-10:00 | 滋养层细胞MEF制备 |
10:00-11:30 | 人ES细胞的胶原酶传代 |
11:30-13:00 | 午休 |
13:00-15:00 | 人ES细胞体外诱导分化 |
15:00-17:00 | 复苏细胞换液观察 |
2017年7月24日 实操课程 | |
9:00-9:20 | 机械传代换液观察 |
9:20-10:30 | 人ES细胞的冻存 |
10:30-11:30 | 人ES细胞的无滋养层培养 |
11:30-13:00 | 午休 |
13:00-14:00 | 人ES体外分化细胞观察 |
14:00-16:00 | 人ES细胞的鉴定:标志基因的免疫荧光染色及碱性磷酸酶染色 |
16:00-17:00 | 颁发结业证书 |
IPS细胞培养技术培训日程(2017年7月25日-28日)
2017年7月25日 理论课程 | |
9:00-10:00 | iPS细胞研究进展介绍 |
10:00-11:00 | 干细胞库及临床干细胞研究介绍 |
11:00-11:30 | iPS细胞制备流程介绍 |
11:30-13:00 | 午休 |
13:00-15:00 | 病毒包装相关质粒的转染 |
15:00-17:00 | 小鼠iPS细胞的传代与类胚体的培养 |
2017年7月26日 实操课程 | |
9:00-11:30 | MEF与HEF的传代与铺板 |
11:30-13:00 | 午休 |
13:00-17:00 | 小鼠胚胎成纤维原代细胞的制备 |
2017年7月27日 实操课程 | |
9:00-9:30 | 小鼠iPS细胞克隆形态观察 |
9:30-11:30 | 标志性基因的免疫荧光染色实验与AKP染色实验 |
11:30-13:00 | 午休 |
13:00-17:00 | 病毒感染 |
2017年7月28日 实操课程 | |
9:00-9:30 | 病毒感染细胞培养液的更换 |
9:30-11:30 | AKP染色、免疫荧光染色结果观察 |
11:30-13:00 | 午休 |
13:00-14:00 | 类胚体形态观察;病毒滴度测定 |
14:00-15:00 | 畸胎瘤形成实验:iPS细胞注射 |
15:00-16:00 | 观察重编程起始阶段的细胞形态变化 |
16:00-17:00 | 颁发结业证书 |
crispr-cas9技术培训日程(2017年7月29日-8月1日)
2017年7月29日 理论课程 | |
9:00-10:00 | 培训班开班仪式,相关情况介绍 |
10:00-11:30 | 专家讲座:基因编辑研究进展报告 |
11:30-13:00 | 午休 |
13:00-15:00 | Crispr/Cas9 基因编辑技术策略 |
15:00-17:00 | 碱基退火 |
2017年7月30日 实操课程 | |
9:00-11:30 | 当天实验内容介绍与背景知识 |
11:30-13:00 | 午休 |
13:00-17:00 | Crispr/Cas9 gRNA 载体构建(载体酶切,连接,转化) |
2017年7月31日 实操课程 | |
9:00-10:00 | 当天实验内容介绍与背景知识 |
10:00-11:30 | 载体构建-挑克隆,小摇PCR鉴定 |
11:30-13:00 | 午休 |
13:00-15:00 | 基因编辑细胞的转染 |
15:00-17:00 | 基因编辑细胞的鉴定 |
2017年8月1日 实操课程 | |
9:00-11:30 | 当天实验内容介绍与背景知识 |
11:30-13:00 | 午休 |
13:00-15:30 | 基因编辑细胞的筛选 |
15:30-16:00 | 实验问题总结与交流 |
16:00-17:00 | 颁发结业证书 |